Неинвазивното пренатално тестване (НИПТ) е съвременен метод за скрининг на фетални хромозомни аномалии чрез анализ на свободно циркулираща фетална ДНК (cfDNA) в кръвта на бременната жена. Точната интерпретация на резултатите от НИПТ изисква разбиране на методологията, статистическите показатели и потенциалните ограничения на теста.

Методология на НИПТ

Събиране на проба

Вземане на венозна кръвна проба от бременната жена, обикновено след 10-та гестационна седмица, когато феталната фракция на cfDNA е достатъчна за анализ.

Изолиране и секвениране на cfDNA

Извличане на cfDNA от плазмата и последващо секвениране чрез масивно паралелно секвениране (MPS) или други технологии за геномно секвениране.

Биоинформатичен анализ

Анализ на получените секвенционни данни за откриване на количествени отклонения, които могат да индикират наличие на хромозомни аномалии като тризомии 21, 18 или 13.

Статистически показатели

Чувствителност и специфичност

НИПТ демонстрира висока чувствителност (над 99%) и специфичност (над 99%) при откриване на тризомия 21 (синдром на Даун). За тризомии 18 и 13 чувствителността и специфичността също са високи, но могат да варират в зависимост от популацията и използваната методология.

Фалшиво положителни и фалшиво отрицателни резултати

Въпреки високата точност, съществува малък процент фалшиво положителни (<0.1%) и фалшиво отрицателни резултати. Фалшиво положителните резултати могат да се дължат на майчини хромозомни аномалии, мозайцизъм или плацентарни мозаицизми. Фалшиво отрицателните резултати могат да се появят при ниска фетална фракция или технически ограничения.

Ограничения и фактори, влияещи на резултатите:

Фетална фракция

Ниската фетална фракция (<4%) може да доведе до неинформативни или неточни резултати. Фактори като ранна гестационна възраст, затлъстяване на майката или хемодилуция могат да намалят феталната фракция.

Майчини състояния

Наличието на злокачествени заболявания, трансплантации или автоимунни заболявания при майката може да повлияе на резултатите от НИПТ.

Многоплодна бременност

Интерпретацията на НИПТ при многоплодни бременности е по-сложна и може да бъде по-малко точна.

Интерпретация на резултатите

Включва докладване по следната номенклатура на кариотипиране (съгласно ISCN = Международна система за цитогенетична номенклатура):

  • уточняване на общия брой хромозоми;
  • уточняване на броя на половите хромозоми;
  • уточняване на всички хромозомни аномалии.

Примерни резултати:

  • Жена с нормален кариотип: 46, XX;
  • Мъж с нормален кариотип: 46, XY;

Когато в организма присъстват две или повече клетъчни линии (мозаицизъм или химеризъм), те се обозначават последователно, разделени със знака “/”, като нормалният диплоиден клон (ако е наличен) се посочва последен.

Например: 45,X/46,XX.

Ако има няколко клетъчни линии, те се подреждат според размера им, като най-големият клон се споменава първи, а броят на клетките във всяка линия се отбелязва в скоби: 45,X(15)/47,XXX(3)/46,XX(12).

При автозомни числови аномалии общият брой хромозоми се посочва като увеличен или намален, а конкретната придобита или загубена хромозома се уточнява в края на формулата. Например:

47,XX,+13 – тризомия 13 при жена;

45,XY,-8 – монозомия 8 при мъж.

При конституционни числови аномалии на половите хромозоми знаците “+” или “–” не се използват. Например:

  • 45,X;
  • 47,XXX;
  • 47,XXY;
  • 47,XYY.

Обратно, ако числовите аномалии на половите хромозоми са резултат от злокачествени клетъчни линии, се използват знаците “+” или “–”. Например:

45,X,-Y – мъж, който е загубил Y хромозомата вследствие на злокачествено състояние.

При наличие на структурни хромозомни аномалии, те се отбелязват в края на кариотипната формула, за да се уточни естеството на пренареждането. Използват се съкращения, обозначаващи типа аномалия, последвани от засегнатата хромозома и съответните точки на счупване.

Примери:

Делеция: 46,XX,del(4)(p15) – Това означава, че при жена има терминална делеция на късото рамо на хромозома 4 в лента p15.

Дупликация: 46,XX,dup(11)(q13q23) – Това показва интерстициална дупликация на дългото рамо на хромозома 11 между ленти q13 и q23 при жена.

Транслокация: 46,XY,t(4;9)(q21.2;p22) – Това обозначава транслокация между дългото рамо на хромозома 4 в лента q21.2 и късото рамо на хромозома 9 в лента p22 при мъж.

Инверсия: 46,XY,inv(9)(p11q21.1) – Това указва перицентрична инверсия в хромозома 9 между ленти p11 и q21.1 при мъж.

Тази номенклатура предоставя точна информация за специфичните хромозомни промени, което е от съществено значение за разбирането на потенциалните генетични последствия.